总蛋白检测试剂盒（双缩脲微板法）

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中文名：总蛋白检测试剂盒(双缩脲微板法)

供应商：上海远慕

规格：120T

有效期： 12个月有效。蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。 

用途：定量检测血清、组织样本中总蛋白含量。

本产说明：酶标仪检测540nm处吸光值。

系列：生化检测

适用范围：本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

总蛋白检测试剂盒(双缩脲微板法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色，所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。

总蛋白检测试剂盒(双缩脲微板法)操作步骤：

1.取1ml蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中，充分溶解后配制成20mg/ml的 蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液。

2.盐水或PBS，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。

3.TP加样操作，按下表依次加入试剂：

4.混匀,孵育。   

5.准孔和各待测孔的吸光度。  

6.当遇到浑浊或溶血样本等，可设”样本空白孔”：取待测样品加入双缩脲空白试剂，以双缩脲空白试剂调零，读取样本空白孔吸光度。用待测孔吸光度减去标本空白孔吸光度后的净吸光度，计算总蛋白浓度。

总蛋白检测试剂盒(双缩脲微板法)注意事项：

1.蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂， 不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。  

2.待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果发现检测效果不佳，可以室温放置1h或 60℃放置15min，颜色会随着时间的延长不断加深。  

3.测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化，可能的原因 是样品中含有铜离子螯合剂。  

4.如果没酶标仪，也可以使用分光光度计测定。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个 试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。  

5.检测中发现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。